Leica Biosystems PELORIS_PELORIS II - Manuale (Pagina 57)

Esecuzione di protocolli
Leica PELORIS Manuale utente, revisione K © Leica Biosystems Melbourne Pty Ltd 2011 57
3.6 Programmazione delle storte
Il processore per tessuti Peloris consente l’esecuzione simultanea di protocolli in entrambe le storte.
La funzione di programmazione automatica tenta di assegnare le stazioni reagenti e i tempi di avvio
in modo che non ci siano conflitti e potrebbe alterare il tempo di fine richiesto facendo iniziare il
protocollo in anticipo o inserendo un ritardo (vedere 3.6.1 Tempi di fine e riempimenti iniziali
ritardati).
Inoltre, all’avvio di un secondo protocollo si potrebbe notare che le stazioni reagenti assegnate al
momento del caricamento del protocollo cambiano all’inizio dell’esecuzione. Questo accade quando
lo strumento deve modificare l’assegnazione per tener conto dei requisiti correnti dei reagenti del
primo protocollo.
Talvolta non è possibile programmare un secondo protocollo. Questa situazione e le possibili
soluzioni vengono discusse nella 3.6.2 Conflitti di reagenti inevitabili. Inoltre, potrà talvolta
succedere che i protocolli non vadano a buon fine se una stazione reagenti diviene
inaspettatamente non disponibile. In 3.6.3 Reagenti non disponibili sono descritti i modi migliori per
evitare questa situazione.
3.6.1 Tempi di fine e riempimenti iniziali ritardati
Non è necessario che i protocolli inizino immediatamente ed è possibile impostare un tempo di fine
obbligatorio che richieda un ritardo prima dell’inizio del protocollo effettivo. Questo periodo di
ritardo può estendersi per molti giorni. Inoltre, quando si seleziona l’opzione di programmazione
ASAP (As Soon As Possible - appena possibile) o se si è richiesto un tempo di fine che non è
possibile ottenere, il processore per tessuti Peloris può essere forzato a ritardare l’inizio del
protocollo. Durante il periodo di ritardo del protocollo, il processore per tessuti Peloris proteggerà le
cassette coprendole con reagente; questo processo è chiamato riempimento iniziale.
Durante il riempimento iniziale, la storta viene riempita con il primo reagente programmato (in
genere un fissativo) per proteggere i campioni. A meno che il reagente non sia paraffina, il
reagente non viene riscaldato o agitato. Se la fase iniziale prevede la paraffina (per protocolli di
riprocessazione o solo con paraffina), la temperatura della storta sarà impostata su pausa paraffina
e l’agitatore sarà impostato sulla velocità della prima fase. Una volta terminato il periodo di
riempimento iniziale, il protocollo verrà eseguito normalmente e finirà al tempo di fine previsto.
Si consiglia di far iniziare tutti i protocolli con la fase del fissativo (anche se molto breve) in modo
che per ogni riempimento iniziale venga utilizzato un fissativo. Se non ci fosse una fase con il
fissativo, un riempimento iniziale potrebbe lasciare il tessuto coperto con disidratante per un lungo
periodo e questo potrebbe indurire e rendere fragile il tessuto.
3.6.2 Conflitti di reagenti inevitabili
I conflitti inevitabili si verificano spesso quando ci sono insufficienti stazioni reagenti disponibili
affinché entrambi i protocolli soddisfino le regole di selezione dei reagenti (vedere 4.1.2 Metodo di
selezione dei reagenti). Questo accade più frequentemente quando si utilizzano i protocolli “in base
al tipo” e “in base alla stazione”, poiché hanno una flessibilità limitata di assegnazione delle stazioni.