Hoefer TE22 - Manuale (Pagina 27)

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EDTA solutiona a
(0,5 M EDTA, pH 8,0, 100 ml)
Na
2
EDTA·2H
2
O (FW 372,2) 0,5 M 18,6 g
Sciogliere in 70 ml di acqua distillata. Portare a pH 8,0 con
NaOH 10 M (circa 5 ml), quindi aggiungere acqua distillata
a 100 ml.
DNA buffer di trasferimento, 10X
(10X Tris-borato-EDTA (TBE) a , pH ~8,2, 1 litro)
Tris (FW 121,1) 900 mM 109,0 g
Acido borico (FW 61,83) 900 mM 55,6 g
EDTA soluzione (0,5 M, pH 8,0) 20 mM 40,0 ml
Acqua distillata a 1,0 litri. Non regolare il pH.
Diluire a 1X prima dell’uso per dare 90 mM Tris, 90 mM di acido
borico, e 2 mM EDTA.
Questa diluizione viene comunemente usato, ma diluizioni
giù da 0,1X. può essere utilizzato qualora sia necessario
diminuire la quantità di corrente nel sistema per controllare il
surriscaldamento.
RNA di trasferimento del buffer, 10X
(10X Tris-acetato-EDTA (TAE) b , pH ~8,4, 1 litro)
Tris (FW 121,1) 400 mM 48,4 g
Acido acetico glaciale (~17,4 M) ~200 mM 11,4 ml
EDTA soluzione (0,5 M, pH 8,0) 10 mM 20,0 ml
Acqua distillata a 1,0 litri. Non regolare il pH.
Diluire a 1X prima dell’uso per dare 40 mM Tris, ~20 mM
acetato, e 1 mM EDTA.
Questa diluizione viene comunemente usato, ma diluizioni
giù da 0,1X. può essere utilizzato qualora sia necessario
diminuire la quantità di corrente nel sistema per controllare il
surriscaldamento.
a Current Protocols in Molecular Biology (1993), A.2.1.
b Sambrook, J., and Russell, D.W. (2001) Molecular Cloning:
A Laboratory Manual, A1.17.