Hoefer TE22 - Manuale (Pagina 13)

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Preparare due lunghezze di 9 mm in vinile o in tubo
in silicone. Fascette scorrevoli (4 in totale) su ogni
estremità di due lunghezze di tubo. Collegare una
estremità di ogni tratto di tubo a una porta scambia-
tore di calore. Attaccare il libero le estremità di cias-
cun tratto di tubo per le porte bagno circolatore;. uno
per l’ingresso e l’altra alla presa fissare i collegamenti
con le fascette.
3
Luogo (non cadere) un agitatore magnetico nel serba-
toio tampone. (Eliminazione di oggetti nel serbatoio
può rompere la piastra di allumina.) Impostare l’unità
su un agitatore magnetico e riempire buffer di trasferi-
mento alla linea di “Start livello di riempimento” sulla
parte anteriore del serbatoio. (Questo richiede circa
0,7 litri).
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Impostare l’agitatore di medio-bassa, che compie la
circolazione del buffer senza forzare tampone attra-
verso le cassette.
Montare la cassetta di trasferimento
1
Pre-wet nitrocellulosa o membrane di nylon con acqua
distillata. Prelavaggio PVDF o altre membrane idrofobe
in metanolo. Poi assorbire tutti i tipi di membrane in
buffer di trasferimento per 2-5 minuti.
2
Aprire la cassetta rilasciando entrambe le linguette
aggancio lungo il bordo opposto alle cerniere.
Posizionare la cassetta aperta in un vassoio pieno di
almeno 3 cm di tampone di trasferimento.
3
Montare la pila di trasferimento in modo che le mole-
cole migreranno verso la membrana. Per macromole-
cole cariche negativamente (come gli acidi nucleici e
la maggior parte delle proteine), costruire la pila sulla
metà grigio della cassetta (e poi posizionare il coper-
chio in modo che il lato grigio affronta il cavo rosso, o
anodo (+).
Nota: Indossare sempre guanti
quando si maneggiano le
membrane per evitare di lasciare
impronte su di loro.
Importante! Fare molta attenzione
a rimuovere le bolle d’aria ad
ogni passo perché la presenza
di bolle d’aria, in particolare tra
la membrana e il gel, il trasferi-
mento blocchi.
Nota: Anche se non è richiesto
di raffreddamento per il vostro
sistema, il buffer deve essere fatto
circolare con un agitatore per
evitare l’esaurimento del buffer in
corrispondenza degli elettrodi.