Bibliografia, Risoluzione dei problemi – Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test Manuale d'uso

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Italiano

Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Istruzioni per l'uso TA9217 IT-CE-Rev_D 08/04/2013

Italiano

Risoluzione dei problemi

Problema

Probabile causa

Azione correttiva

Segnale/

colorazione

fluorescente

assente o debole

Fissazione o lavorazione errata

dei campioni test

Accertatevi che venga utilizzato un fissativo a

base di formalina e che i tempi di lavorazione

siano idonei per il test a cui è sottoposto il

campione.

Il Leica HER2 FISH System - 30

Test è stato utilizzato oltre la

data di scadenza

Accertatevi che il Leica HER2 FISH System -

30 Test utilizzato non sia già scaduto.

Selezione protocollo errata

Verificate che vi sia il default corretto su

*FISH Protocol A nel campo protocollo di

colorazione della finestra di dialogo Agg.

vetrino.

Distribuzione di reagenti sfusi

errati

Verificate che tutti i reagenti Leica BOND

siano stati assegnati ai contenitori sfusi

appropriati e messi in posizione corretta sullo

strumento.

Deparaffinizzazione inadeguata

dei vetrini

Accertatevi che sia selezionata la modalità

*Dewax nel campo Preparazione della

finestra di dialogo Agg. vetrino.

Pretrattamento non adatto

Accertatevi che siano stati selezionati i

protocolli di pretrattamento predefiniti (HIER

e Digestione Enzimatica).

Regolare il protocollo di pretrattamento (HIER

o Digestione Enzimatica), se necessario.

Denaturazione inadeguata

Accertatevi che sia stata selezionata la

denaturazione predefinita *D10.

Ibridazione inadeguata

Accertatevi che sia stata selezionata

l'ibridazione predefinita *H12.

Estendere il tempo di ibridazione, se

necessario.

Eccesso lavaggio post-

ibridazione

Ridurre il tempo di incubazione lavaggio post-

ibridazione.

Seduta interrotta prima del

completamento

Utilizzando il software Leica BOND,

confermate la presenza di qualsiasi errore

riportabile durante la seduta di colorazione

e agite come indicato dal software Leica

BOND.

Attrezzatura di microscopia a

fluorescenza non adatta

Set filtri non adatto

Lampada non corretta

Lampada scaduta

Tipo di olio non corretto

Accertatevi che tutta l'attrezzatura di

microscopia a fluorescenza utilizzata sia

appropriata per l'analisi che si deve eseguire,

confermate:

Set filtri adatto

Lampada adatta

Potenza lampada buona

Olio adatto per microscopia ad

immersione

Esposizione eccessiva alla luce

UV (photobleaching)

Conservate i vetrini al buio prima e dopo la

valutazione per preservare i segnali fluorescenti.

Per una preservazione a lungo termine del

segnale, conservate i vetrini a –20 ºC.

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