4 descrizione dell’apparecchio – Eppendorf Multiporator Manuale d'uso

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Collegare la micro-camera di fusione all'attacco coassiale del cavo.

Mettere a fuoco gli elettrodi e le cellule al microscopio.

Attivare i parametri impostati con il tasto START continuando
l’osservazione al microscopio (vedi Capitolo 5.3).

Fig. 6: Ripresa al microscopio delle cellule durante l'allineamento e dopo la fusione

con singoli prodotti di fusione

I parametri calcolati come ottimali possono essere applicati direttamente
per la fusione nella camera di fusione elicoidale (vedi Capitolo 4.8.4).

4.8.2 Micro-camera di fusione (distanza inter-elettrodo 0,5 mm)

Tra gli accessori non di serie (si vedano le informazioni per l'ordinazione)
è compresa una microcamera di fusione con una distanza inter-elettrodo
diversa di 500 µm. Grazie a questa micro-camera di fusione è possibile
realizzare la fusione delle cellule controllandola al microscopio.

Informazioni generali riguardo l'impiego di questa microcamera di fusione
sono riportate al Capitolo 4.8.1 e nel manuale di applicazione di base
elettrofusione compreso nella dotazione del modulo di fusione.

Avvertenza importante:

Per il calcolo dei parametri di fusione (vedi il

manuale di applicazione di base elettrofusione) è necessario considerare
la diversa distanza inter-elettrodo di 500 µm. Notare che i parametri misu-
rati ottimali

non

possono essere acquisiti direttamente per la fusione nella

camera di fusione elicoidale.

4.8.3 Pulizia della micro-camera di fusione

Per rimuovere il contenuto della micro-camera di fusione si effettua un
lavaggio con acqua bidistillata (flacone spray), mentre i residui più
resistenti potranno essere eliminati passando delicatamente uno
spazzolino da denti a setole morbide in direzione longitudinale rispetto
agli elettrodi (attenzione a non modificare la distanza inter-elettrodo!).
Per accelerare il processo di asciugatura si può effettuare un risciacquo
supplementare con alcool etilico (70 %, non denaturato).

200 µm

Cellule dopo la fusione e prodotti di fusione

cellule tra gli elettrodi

Allineamento delle

(alignment)

4 Descrizione dell’apparecchio

Multiporator_Text_it.fm Seite 146 Freitag, 9. Juni 2006 8:09 08

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