Eppendorf Multiporator - Manuale (Pagina 18)

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– Collegare la micro-camera di fusione all'attacco coassiale del cavo.
– Mettere a fuoco gli elettrodi e le cellule al microscopio.
– Attivare i parametri impostati con il tasto START continuando
l’osservazione al microscopio (vedi Capitolo 5.3).
Fig. 6: Ripresa al microscopio delle cellule durante l'allineamento e dopo la fusione
con singoli prodotti di fusione
I parametri calcolati come ottimali possono essere applicati direttamente
per la fusione nella camera di fusione elicoidale (vedi Capitolo 4.8.4).
4.8.2 Micro-camera di fusione (distanza inter-elettrodo 0,5 mm)
Tra gli accessori non di serie (si vedano le informazioni per l'ordinazione)
è compresa una microcamera di fusione con una distanza inter-elettrodo
diversa di 500 µm. Grazie a questa micro-camera di fusione è possibile
realizzare la fusione delle cellule controllandola al microscopio.
Informazioni generali riguardo l'impiego di questa microcamera di fusione
sono riportate al Capitolo 4.8.1 e nel manuale di applicazione di base
elettrofusione compreso nella dotazione del modulo di fusione.
Avvertenza importante: Per il calcolo dei parametri di fusione (vedi il
manuale di applicazione di base elettrofusione) è necessario considerare
la diversa distanza inter-elettrodo di 500 µm. Notare che i parametri misu-
rati ottimali
non possono essere acquisiti direttamente per la fusione nella
camera di fusione elicoidale.
4.8.3 Pulizia della micro-camera di fusione
Per rimuovere il contenuto della micro-camera di fusione si effettua un
lavaggio con acqua bidistillata (flacone spray), mentre i residui più
resistenti potranno essere eliminati passando delicatamente uno
spazzolino da denti a setole morbide in direzione longitudinale rispetto
agli elettrodi (attenzione a non modificare la distanza inter-elettrodo!).
Per accelerare il processo di asciugatura si può effettuare un risciacquo
supplementare con alcool etilico (70 %, non denaturato).
200 µm
Cellule dopo la fusione e prodotti di fusione
cellule tra gli elettrodi
Allineamento delle
(alignment)
4 Descrizione dell’apparecchio
Multiporator_Text_it.fm Seite 146 Freitag, 9. Juni 2006 8:09 08