Hoefer SE400 - Manuale (Pagina 28)

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2.5 Risoluzione del campione
Parametri elettroforesi per gel di poliacrilammide
discontinui
I gel possono essere eseguiti sia in costante
impostazioni correnti o tensione costante. Una
impostazione corrente costante è tradizion-
almente utilizzato con un sistema tampone
discontinuo modo che la velocità di migrazione
elettroforetica rimane invariato per tutta la
corsa. In costante condizioni attuali, gli aumenti
di tensione man mano che procede di esecuzione.
Un valore minore di corrente è raccomandata
per una maggiore risoluzione. Il livello ottimale
di corrente deve essere determinato empirica-
mente, i principali fattori che devono essere
equilibrato sono la concentrazione di gel e la
velocità di migrazione, e il riscaldamento Joule
risultante e distorsione banda. Tabella 3 liste di
partenza le linee guida del punto e le regolazioni
per lo spessore del gel, il numero di gel, e il tasso
di migrazione.
Tabella 3. Sistema tampone Laemmli punto di partenza
le linee guida
Gel di spessore* 1,5 mm
Corrente per gel † 25 mA corrente costante
Avvio di tensione 80–90 V
Gel lunghezza (cm) modello finale di tensione (V)
16 SE400 200–250
24 SE410 275–325
* Gel più spessi o più sottili richiedono proporzionalmente più
o meno corrente. Per esempio, un gel 0,75 mm, che è la
metà dello spessore di un gel 1,5 mm, richiede metà molta
corrente, o 12,5 mA.
† La corrente deve essere moltiplicata per il numero di gel. Ad
esempio, se un millimetro 1 2-gel a sandwich è installato,
corrente doppio è necessario che per un singolo 1 mm gel
alla stessa tensione.
Nota: La sezione trasversale
(e requisito corrente) è
determinata dallo spessore
gel. Il tempo di esecuzione è
determinata dalla lunghezza
della piastra.