Hoefer IEF100 - Manuale (Pagina 28)

• p22
Nota: Le soluzioni reidratazione
tipicamente contengono elevate
concentrazioni di urea che tendono a
cristallizzare a temperature più basse.
Per questo motivo, reidratazione non
deve essere fatto in celle frigorifere o
in ambienti freddi significativamente
superiore a 20 °C.
Nota: Le strisce scorrevole nel
buffer di reidratazione, bagnando
tutta la lunghezza della striscia, e
aiuta a prevenire attaccare. Strisce
collocati direttamente contro
il fondo del vassoio di plastica
reidratazione può aderire, e non
reidratare correttamente.
Reidratazione di strisce IPG
Una breve discussione di ingredienti di reidratazione e la loro funzione
è inclusa in Appendice B, insieme ad alcune soluzioni consigliate. I
reagenti possono essere personalizzate per i campioni specifici.
Il volume di soluzione dipende dalla lunghezza della striscia da utiliz-
zare. Hoefer consiglia di seguire le raccomandazioni del produttore
strip IPG.
Una tabella dei volumi tipici è riportato qui di seguito.
Striscia di Volume per
lunghezza (cm) Striscia (μl)
7 130
18 340
24 450
Applicare soluzione reidratazione in un canale del vassoio reidrata-
zione opportunamente dimensionato in una linea leggermente più
corta la striscia da reidratati.
Molti produttori strip IPG coprono le strisce con un coperchio di
protezione. Se presente, rimuovere lo strato protettivo.
Posizionare la striscia, gel lato basso, sul liquido nel canale. Far
scorrere delicatamente la striscia avanti e indietro per bagnare tutta
la lunghezza del gel IPG con la soluzione di reidratazione. Talvolta,
il sollevamento e la striscia IPG può aiutare a ottenere il corretto
contatto della soluzione su tutta la lunghezza della striscia gel IPG.
Coprire le strip con olio minerale, numero d’ordine Hoefer GR138-1.
Lasciare reidratare un minimo di 8 ore. Meglio reidratazione si veri-
fica se consente strisce per reidratare durante la notte.
Nota: L’utilizzo di più rispetto ai
volumi raccomandati può contribuire
alla perdita di proteine o di risultati
IEF sfocate.
Nota: Il IEF100 è un posto comodo
per reidratare strisce. Il piatto freddo
mantenere una temperatura costante,
e la copertura aiuterà a proteggere le
strisce IPG dalla polvere.