Hoefer HE99X - Manuale (Pagina 18)

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Note, tamponi, e volumi
Esecuzione di buffer di DNA in gel
di agarosio
Le ricette per i tre tamponi più comunemente
usati funzionamento per elettroforesi DNA sono
elencati di seguito. La capacità tampone sia TBE
e TPE è di solito sufficiente in modo che la circo-
lazione del buffer non è necessaria. Circolazione
può essere richiesto durante corre più di 3 ore o
quando si utilizza il tampone TAE.
1. 10X Tris-borato-EDTA (TBE) della scorta a
(0,89 M Tris, 0,89 M acido borico, 20 mM EDTA,
pH ~8,2, 1000 ml)
Tris base (FW 121,1)
0,89 M 108,0 g
Acido borico (FW 61,8) 0,89 M 55,0 g
EDTA soluzione
(0,5 M, pH 8,0, sol. 4)
0,02 M 40,0 ml
H
2
O deionizzata a 1000,0 ml
Mescolare. Non regolare il pH. Prima dell’uso diluire
sia a: 0,5X, per ottenere 45 mM Tris base 45 mM
acido borico, e 1 mM EDTA. Questa diluizione viene
spesso usato perché la corrente rimane bassa, con
conseguente meno calore.
-O-
1X, per dare 89 mM Tris base 89 mM di acido borico,
e 2 mM EDTA.
Importante! Non regolare il pH
di tali buffer volta che sono
preparati secondo la ricetta!