Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System - Manuale (Pagina 6)

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Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System Instructions for Use TA9145 IT-CE-Rev_E 18/06/2013
Procedura
A. Reagenti necessari ma non forniti
• BOND Dewax Solution (codice prodotto AR9222)
• BOND Epitope Retrieval Solution 1 (codice prodotto AR9961)
• BOND Wash Solution x10 Concentrate (codice prodotto AR9590)
• Solventi standard utilizzati in immunoistochimica (ad es., etanolo, assoluto e graduato)
• Xilene (o sostituti di xilene)
• Strumento di montaggio
• Acqua distillata o deionizzata
B. Attrezzature necessarie ma non fornite
• Sistema(i) di colorazione avanzata, completamente automatizzata Leica Biosystems’
BOND-MAX e BOND-III
• BOND Universal Covertiles
TM
(codice prodotto S21.2001 oppure S21.4583)
• BOND Mixing Stations (codice prodotto S21.1971)
• Forno essiccante in grado di mantenere una temperatura pari a 60 °C
• Microscopio luminoso (ingrandimento obiettivo 4–40x)
• Vetrini (Leica BOND Plus Slides – codice prodotto S21.2113)
• Vetrini coprioggetti
• BOND Slide Label & Print Ribbon (codice prodotto S21.4564)
• BOND Aspirating Probe Cleaning System (codice prodotto CS9100)
C. Metodologia
• Prima di applicare questa metodologia, gli utilizzatori devono apprendere le tecniche di
immunoistochimica completamente automatizzate BOND.
• Ciascuna sezione test da colorare con HER2 Primary Antibody richiederà una sezione
identica per la colorazione con HER2 Negative Control. La sezione di controllo negativo
consente di differenziare la colorazione specifica da quella aspecifica nel sito antigenico.
Ciascuna seduta di colorazione BOND dovrebbe includere un HER2 Control Slide.
Al termine del protocollo di colorazione, se le linee cellulari non mostrano i modelli di
colorazione corretti (si veda Bond Oracle HER2 IHC Systems Interpretation Guide), la
seduta non andrebbe considerata valida.
D. Disposizione dei vetrini
Un nuovo BOND Universal Covertile (codice prodotto S21.2001 oppure S21.4583)
deve essere utilizzato per ciascun vetrino. L'utilizzo di BOND Universal Covertiles,
precedentemente utilizzato per la colorazione per ibridazione in situ o immunoistochimica,
non è stato validato dal presente test.
La disposizione del vassoio di vetrini (Tabella 2) rende possibile la prestazione ottimale del
Bond Oracle HER2 IHC System e il raggiungimento completo dei 60 test.