Hoefer SE250 - Manuale (Pagina 18)

Nota: I pozzi laterali per
gli standard di un pettine
preparativa corrispondono alle
outer-la maggior parte dei pozzi
formati dai 10 e pettine.
Nota: La quantità di campione
proteine aggiunte a ciascun
pozzetto dipende sia dalla
sensibilità del metodo di
colorazione e la distribuzione
di proteina tra bande separate.
Con Coomassie Blu™, è
possibile rilevare 1 µg in una
banda singola, con le macchie
d'argento più sensibili, è
possibile rilevare un minimo di
10 ng.
Per asciugare campioni proteici, aggiungere volumi
uguali di tampone e ddH
2
O per ottenere la concentra-
zione desiderata. Riscaldare il tubo in acqua bollente
per 90 secondi, poi raffreddare in ghiaccio fino al
momento dell'uso. Campioni trattati possono essere
conservati congelati per le corse successive. (Conser-
vare a -40 °C a -80 °C.)
3
Per facilitare il caricamento dei campioni, bagnare
ben localizzazione decalcomania e applicarlo alla
parte anteriore della lastra di vetro in modo che il
bordo appropriato delinea dei pozzetti campione.
4
Riempire il campione pozzetti e ciascuna camera
tampone superiore che verrà utilizzato con tampone di
corsa. Una camera tampone superiore contiene circa
75 mL.
5
Underlay il campione nei pozzetti utilizzando una
punta fine microsiringa. La larghezza dei pozzetti
dipende dal numero di pozzetti per pettine. Se il
pettine ha un minor numero di pozzi, sono più larghe,
e richiedono più volume di aumentare il livello di
1 millimetro, come mostrato nella tabella seguente.
Volume del campione (µL) per 1 mm di profondità
numero di spessore pettine (mm)
pozzi 0,75 1,0 1,5
5 9,5 12,7 19,1
9 5,8
10 3,6 4,8 7,2
15 2,2 2,9 4,4
18 2,9
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