Hoefer TE70X - Manuale (Pagina 13)

•
p5
4
Preparare la carta assorbente
Per ogni gel, tagliato almeno 6 pezzi di carta assor-
bente della stessa dimensione del gel o leggermente
inferiore.
Gauge lo spessore o il numero di strati di carta assor-
bente secondo la quantità di buffer richiesta, fino a
300 ml di tampone può essere richiesto per grandi
gel o di trasferimento di 60 minuti al fine di evitare la
pila di essiccazione o il buffer di diventare impoverito.
Saturare almeno 3 pezzi di carta assorbente con il
buffer di trasferimento. Uno dopo l’altro, sul centro
di ogni foglio l’elettrodo inferiore e rimuovere l’aria
intrappolata tirando una pipetta pulita o rullo dal
centro verso i bordi.
5
Preparare la membrana
Per ogni gel, tagliare 1 membrana della stessa dimen-
sione del gel o leggermente inferiore. (Una membrana
più grande può contattare un pannello di elettrodi,
creando un percorso attraverso il quale corrente può
bypassare il gel.)
Pre-wet nitrocellulosa o membrane di nylon con acqua
distillata. Prelavaggio PVDF o altre membrane idrofobe
con metanolo. Poi assorbire tutti i tipi di membrane in
buffer di trasferimento per 2-5 minuti.
Nota: Ogni 21 × 26 cm blot carta
assorbirà circa 50 ml di tampone
di trasferimento. Ogni carta blot
14 × 16 cm in grado di assorbire
circa 20 ml di tampone.
Nota: Se non si utilizza la
carta assorbente Hoefer, i
pezzi aggiuntivi possono essere
necessarie per ottenere i risultati
desiderati.
Nota: Indossare sempre guanti
quando si maneggiano le
membrane per evitare di lasciare
impronte digitali.