Hoefer SE640 - Manuale (Pagina 38)

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La percentuale totale di acrilammide (% T) nel
gel risoluzione, che può variare da 5 a 20%,
determina la dimensione dei pori. Comunemente,
la quantità di reticolante usato (% C) è 2,6%.
Nel sistema seguente esempio, la composizione
gel risolvere è 10% T, 2,6% C, che si traduce in
una dimensione di pori media. La composizione
gel di impilamento al 4% T, 2,6% C. La T%
in gel di impilamento è inferiore in quanto una
dimensione dei pori maggiore è richiesto.
Le concentrazioni finali
Tampone per
Gel separatore Stacking gel elettroforesi
Acrilamide conc. 10% T*, 2,6% C 4% T, 2,6% C
Tris-Cl 0,375 M 0,125 M
Tris-Glycina 0,025 M Tris base
0,192 M glycina
pH 8,8 6,8 ~8,3
SDS 0,1% 0,1% 0,1%
Ammonio persolfato (APS) 0,05% w/v 0,05 – 0,1% w/v
TEMED † 0,05% v/v 0,05 – 0,1% v/v
* Per ottenere qualsiasi altra operazione di concentrazione finale desiderata, regolare i volumi di acrilammide magazzino e
acqua. Volumi per diverse concentrazioni sono elencati a pagina 34.
† Tetramethylethylenediamine