Hoefer SE640 - Manuale (Pagina 21)

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Gradiente gel
Gel gradiente sia lineari che esponenziale può
essere versato nel gel caster duale. Si consiglia di
utilizzare uno Hoefer SG Maker Gradient Series.
Gel gradiente vengono versate con una cannula
dall’alto della ruota gel duale (vedi Fig. 5). Un
gel di impilamento viene poi versato sul gradi-
ente di gel.
Versando un gel gradiente lineare
1
Montare sandwich(es) nel gel caster dual come
descritto a pagina 8.
2
Impostare il percorso di soluzione di monomero di flusso
Eseguire una lunghezza di Tygon
™ tubo attraverso
una pompa peristaltica. Collegare un’estremità del
tubo alla porta di uscita gradiente maker e l’altra
estremità ad una cannula 9 cm. (L’OD della cannula
deve essere inferiore allo spessore distanziatore.)
Posizionare la cannula in modo che poggia sul fondo
della metà panino, tra i distanziatori.
3
Preparare la soluzione di monomero
Calcolare il volume di soluzione di monomero
necessario. Dividete il volume totale a metà e
preparare questo volume di entrambi i superiore e
inferiore percentuale di acrilammide soluzioni.
Fig 5. Versando un gradiente di gel.
La soluzione gel può essere intro-
dotto nel sandwich di gel attra-
verso una punta di pipetta ad una
velocità che mantiene un flusso
continuo.
Opzionale: Regolare la
percentuale superiore soluzione
acrilammide al 15% (w/v) di
saccarosio o 25% (v/v) glicerolo
per migliorare la stratificazione.