Luminex xPONENT 4.1 and MAGPIX - Manuale (Pagina 22)

un granulo di controllo diverso. Lo scopo di questa procedura di manutenzione è di misurare
la quantità (come percentuale) del primo set di granuli in Fluidica 1 che si trova nel pozzetto
dove è stata caricata Fluidica 2.
Volume campione
I volumi dei campioni variano in valori compresi tra 20 µl e 200 µl. Accertarsi che dopo
l'aspirazione nel pozzetto restino circa 25 µl in più del volume campione. Questa quantità può
variare in base al tipo di piastra utilizzata. Il volume campione deve essere abbastanza
grande da evitare che si aspiri aria nella linea dei liquidi quando si acquisisce il campione, e
abbastanza piccolo da impedire fuoriuscite quando l'analizzatore vuota le linee di
campionamento dopo aver acquisito il campione espellendo circa 75 µl di campione
nuovamente nel pozzetto.
Esempi
• Utilizzando un volume campione di 50 µl e aspirando 50 µl, si otterranno bolle d'aria.
• Se si usa un volume campione di 200 µl e un prelievo standard di 50 µl, il pozzetto
tracimerà quando l'analizzatore svuota le linee dopo l'acquisizione espellendo il liquido
nuovamente nel pozzetto, poiché la quantità di liquido rinviata nel pozzetto è di circa 75 µl.
Attenzione: Il volume campione ha un'importanza fondamentale per il
corretto funzionamento dello strumento MAGPIX. Se si
aspirano pochi granuli il relativo conteggio può risultare
insufficiente o i dati dei risultati non significativi. Al contrario,
aspirando troppi granuli si potrebbe saturare la camera
impedendo una corretta classificazione dei granuli, che
potrebbe dar luogo a conteggi insufficienti o a dati non
conclusivi.
Questa formula esprime le restrizioni di volume nel design dell'analisi:
Dove:
• Volume pozzetto totale = Volume iniziale del campione prima dell'acquisizione dello
strumento. Il volume del campione è determinato dalla consistenza dell’insieme di granuli.
• Volume di assorbimento del campione = Volume di assorbimento per acquisizione
(programmare questa quantità nel protocollo come volume campione).
• 75 (μl) = Volume rinviato al pozzetto.
• Massimo volume dei pozzetti = La massima capacità dei pozzetti in una determinata
piastra microtitolo a 96 pozzetti.
È possibile modificare le dimensioni del campione durante l'esecuzione di un batch usando il
pulsante Change Volume (Cambia volume) nella scheda Current Run (Esecuzione
corrente).
Se si esegue un kit basato su MagPix, seguire le istruzioni del foglietto illustrativo del kit o il
protocollo software fornito.
Non diluire i granuli di calibratura o di verifica MagPix, o i granuli di Fluidica 1 e Fluidica 2.
Piastre
Quando si scelgono le piastre attenersi alle seguenti indicazioni:
Introduzione
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