Hoefer SE640 - Manuale (Pagina 29)

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Tempo
Una corsa è completo quando il colorante
inseguimento raggiunge il fondo del gel. A 1,5 mm
di spessore Laemmli SDS gel, eseguito a 25 mA/gel
senza raffreddamento, di solito richiede 2,5 ore.
Parametri per elettroforesi DNA / gel acrilamide
Gel di DNA che di solito funzionano ad una
regolazione di tensione costante, e poiché i sistemi
tampone sono continui, entrambe le letture di
corrente e tensione rimangono costanti per tutta la
corsa. Condizioni di funzionamento sono espressi in
unità di V/cm. Pubblicato condizioni di funzionamento
variano ampiamente, ma tensioni nell’intervallo da 1 a
3 V/cm sono comuni per corse notte.
Registrare ogni corsa
Mantenere un record della corrente o della tensione
impostazione, il numero e lo spessore di gel, sistemi
tampone, e le letture iniziale e finale di corrente
o di tensione per ogni ciclo in modo che i risultati
possono essere confrontati. Risultati incoerenti per lo
stesso sistema e le impostazioni di indicare potenziali
problemi come perdite attuali, le concentrazioni di
tampone errati, elevate concentrazioni saline o la
qualità chimica incoerente.
Verificare i progressi band dopo 5 minuti, e di nuovo
dopo un’ora, tenendo d’occhio il tasso di migrazione
del colorante inseguimento. La pista è completa
quando il colorante inseguimento raggiunge il fondo
del gel. Vedere il livello del buffer e, se necessario,
alimentarlo come richiesto per mantenere l’elettrodo
superiore sommerso. (Un piccolo volume di tampone
può fuoriuscire oltre una piastra intaccate o
guarnizione, o tampone può passare attraverso il gel.)
Attenzione! Dopo il monitoraggio
iniziale, non lasciare incustodito
l’apparecchio per più di 1 h
prima di verificare l’andamento
delle bande e il livello del
buffer.