Hoefer SE900 - Manuale (Pagina 28)

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Problema Soluzione
Strumento Problemi:
Nessuna tensione o corrente all'inizio della corsa Lo strumento non collegato correttamente alla rete elettrica. Assicurarsi che
cavi di alta tensione sono collegate in corrette terminali + / - ed è sicuro. In
alcuni casi può essere necessario adattatori.
Elettrodo rotto. Verificare la continuità del filo con un voltmetro.
Il coperchio non fissato correttamente su connettori a banana. Riposizionare
il coperchio e controllare è adatto saldamente in posizione.
Interruzione linea piombo HV. Verificare la continuità del filo con un voltmetro.
Risultati 2D Problemi:
Striature di campione verticale verso il basso
Strip IPG non posizionato correttamente sulla superficie del gel. Evitare di
dalla parte superiore del gel verso il fondo del gel gel scriccatura separazione durante il caricamento strisce.
Eseguire il trattamento iodoacetamide.
Assicurarsi striscia IPG uniformemente a contatto con la superficie del gel
lungo l'intera lunghezza della striscia.
Sovraccarico di proteine.
Striature orizzontale delle proteine Scarsa preparazione del campione.
Messa a fuoco inadeguati.
Scarso contatto tra la Striscia di IPG e il gel seconda dimensione.
Spot sono inclinate o distorte Gel correre troppo veloce la migrazione irregolare.
Sovrapporre il gel soluzione con acqua satura di n-butanolo prima della polim-
erizzazione inizia ad evitare la formazione di una superficie irregolare gel.
Gel polimerizzazione irregolare o formazione di pendenze. Vedere colata
problemi di maggiore sostegno.
Strip IPG non posizionato correttamente sulla superficie del gel. Evitare di
gel scriccatura separazione durante il caricamento strisce.
Ingresso campione nel gel seconda dimensione è troppo elevata funzionare a
un livello di potenza. Esegui gel in condizioni di tempi di rodaggio.
Bubbles presenti in gel seconda dimensione distorcerà la migrazione spot.
Nessun proteine visibili su gel seconda Quantità caricata troppo poco per il metodo di rilevazione. Aumentare il
dimensione dopo colorazione carico di proteine o di provare un metodo di colorazione più sensibile.
Campione troppo poco applicata al gel prima dimensione. Controllare la
concentrazione proteica del campione.
Equilibrazione passaggi troppo corto o troppo lungo. Eseguire ogni passaggio
di equilibratura per 10-15 minuti.
Regioni vuote nel gel seconda dimensione Tris, sali, e SDS possono provocare alterazioni della posizione di messa a
fuoco delle proteine nella prima dimensione. Ridurre o eliminare questi
composti dalla prima dimensione.
Bolle tra la striscia e il gel seconda dimensione.