Ipg strip equilibrazione, Smontaggio del caster multipla gel – Hoefer SE900 Manuale d'uso

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Smontaggio del Caster multipla Gel

1

Posizionare la ruota verso il basso sulla sua schiena in un vassoio o nel
lavandino.

2

Rimuovere le pinze rosse e le viti che fissano il frontalino al caster.

3

Sfilare il frontalino.

4

Rimuovere cassette di gel e fogli di riempimento. Sciacquare al di
fuori delle cassette gel per rimuovere l'eccesso di acrilammide polim-
erizzata.

5

Pulire le molteplici componenti caster gel con un detergente di labora-
torio. Risciacquare e lasciare asciugare all'aria.

IPG Strip equilibrazione

Prima strisce IPG sono posizionati sulla sommità del gel seconda
dimensione, il buffer nelle strisce deve essere sostituita con un
tampone appropriato per PAGE.

Equilibrare IPG strisce nei buffer equilibrazione appropriati. Tipi-
camente, un equilibrio due step (prima con DTT e un secondo con
iodoacetamide) dà risultati migliori rispetto a un solo passo equilibrio
DTT. La seguente procedura è raccomandata.

Procedura di equilibrazione

1

Scongelare due aliquote della soluzione di equilibrazione.

2

Aggiungere 10 mg / ml di DTT una soluzione.

3

Posizionare le strisce IPG nella reidratazione / equilibrio vassoio o un
tubo di vetro.

4

Aggiungere 6,5 ml di soluzione per ciascuno slot contenente una
striscia di IPG.

5

Posizionare il rocker per 10-15 minuti.

Dopo equilibrio, scartare la prima soluzione di equilibrio in
modo appropriato.

6

Aggiungere 25 mg / ml iodoacetamide (IAA) alla seconda aliquota di
soluzione di equilibrazione.

7

Aggiungere 6,5 ml di soluzione per ciascuno slot contenente una
striscia di IPG.

8

Posizionare il rocker per 10-15 minuti.

Dopo equilibrio, eliminare la seconda soluzione di equilibrio in modo
appropriato.

Equilibrazione seguito, le strisce IPG sono posizionati sulla sommità del gel
seconda dimensione, e sigillato in posizione con la sovrapposizione agarosio.

Nota: Il Rack Plate, SE914, è un accessorio
utile per contenere temporaneamente le
cassette gel caso di smontaggio del caster
multiple gel.

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