Hoefer SE900 - Manuale (Pagina 30)

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Appendice A: Teoria e Ricette
Laemmli sistema Gel
Il sistema Laemmli è il protocollo più comune per elettroforesi
SDS-proteine denaturate.
Lo ione leader in questo sistema tampone è discontinuo e lo ione
cloruro finale è glicina.
Di conseguenza, il gel risoluzione (e il gel di impilamento opzionale)
contengono Tris-Cl (buffer di diversa concentrazione e pH), e il
tampone di elettroforesi contiene Tris-glicina. Tutti i buffer conten-
gono 0,1% SDS.
Gel poliacrilammide composizione è indicata da due
diverse percentuali:
% T = total acrylamide = [g (acryl + bis)] × 100
100
% C = crosslinker = g (bis) × 100
g (acryl + bis)
La percentuale totale di acrilammide (% T) nel gel risoluzione, che
può variare da 5 a 20%, determina la dimensione dei pori. Comun-
emente, la quantità di reticolante usato (% C) è 2,6%.