Hoefer SE215 - Manuale (Pagina 9)

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Disaerare la soluzione di monomero e aggiungere
l’iniziatore e catalizzatore appena prima di versare il
gel. Riempire la soluzione in un solo panino, consen-
tendo la scanalatura nel tappo inferiore per distribuire
la soluzione in modo uniforme tra tutti i panini.
(Versando in più di un panino potrebbe introdurre
sacche d’aria.) Guarda il livello di soluzione attraverso
il frontalino. Vedi sotto per il livello della soluzione
appropriata a seconda dell’applicazione.
No stacking gel
Riempire con soluzione appena sotto la parte supe-
riore della piastra dentata. Se formano sacche d’aria,
rimuoverli con una pipetta o una siringa. Introdurre
un pettine (con una leggera angolazione) in ogni
sandwich, facendo attenzione a non intrappolare l’aria
sotto i denti.
Stacking gel
Riempire con una soluzione di 3 cm sotto la parte
superiore della lastra di vetro rettangolare. Questa
altezza permette 1 cm di gel di impilamento al di
sotto del pozzetti. Versare il gel e applicare un over-
lay. (Vedi punto 3.) Dopo che il gel è impostato, la
preparazione del gel di impilamento come descritto di
seguito.
2-D elettroforesi
Riempire con soluzione di circa 1 cm sotto la parte
superiore della lastra di vetro rettangolare. Questa
altezza permette di 4 a 5 mm di spazio per l’IPG Strip
e un sigillo di agarosio). Sovrapporre il gel di separaz-
ione, come descritto al punto 3.
3
Se colata gel di poliacrilammide, sovrapporre ciascun
gel con un sottile strato di acqua satura n-butanolo,
acqua, o tampone gel diluito per evitare l’esposizione
all’ossigeno gel. Applicare la stessa quantità di
ciascun gel di mantenere i livelli di gel della stessa.
Fornire la soluzione sovrapposizione lentamente vicino
al distanziatore a lato del sandwich. Lasciare la soluz-
ione di fluire attraverso la superficie nudo.
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Lasciare il gel per polimerizzare per almeno 1 ora.
Vedere pagina 12 per lo smontaggio dello stack.
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p7
Nota: evitare il contatto
prolungato e ripetuto di
n-butanolo con la camera di
colata acrilico per impedire la
acrilico di diventare opaco.