Hoefer SE300 miniVE - Manuale (Pagina 17)

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Attenzione! L’acrilamide è
una neurotossina. Indossare
sempre guanti e osservare tutte
le procedure di laboratorio di
sicurezza.
Nota: Circa 10 ml di soluzione
di monomero è necessario per
esprimere un gel di 1 mm di
spessore.
A 1 cm di gel di impilamento al di sotto del pozzetti
Riempire a 3 cm sotto la parte superiore della
lastra di vetro rettangolare. Sovrapposizione
ciascun gel con un sottile strato di acqua satura
n-butanolo, acqua, o tampone gel diluito per
impedire l’esposizione alla soluzione di mono-
mero di ossigeno. Utilizzare una siringa di vetro
munito di un 22-gauge per applicare 100 µl della
soluzione di sovrapposizione lentamente a un
lato del sandwich, in prossimità del distanzia-
tore. Lasciare la soluzione di fluire attraverso la
superficie nudo.
Dopo la polimerizzazione

Lasciare un minimo di un’ora per polimerizzare
il gel per.

Se un pettine è a posto, rimuoverlo tirando con atten-
zione sul pettine, mentre delicatamente dondolandosi
avanti e indietro per rompere il vuoto. Sciacquare i
pozzetti con tampone di elettroforesi per rimuovere
qualsiasi acrilamide non polimerizzato.
Se una sovrapposizione è stata applicata, risciac-
quare il sandwich più volte con acqua bidistillata per
rimuoverlo. Capovolgere il modulo per drenare.
Per assicurare un contatto perfetto tra il risolvere e
il gel di impilamento, rimuovere i residui di liquido
tamponando un angolo del gel con un panno privo di
pelucchi.
Casting il gel di impilamento

Preparare la soluzione di monomero gel di impilamento.

Disaerare l’impilamento soluzione di monomero gel,
aggiungere catalizzatore e promotore e poi versate.
Usare una pipetta per offrire la soluzione in un angolo
del piatto, facendo attenzione a non intrappolare bolle.